bèta-lactamase

De -lactamase verwijst naar een inactiverend enzym dat in staat is de hydrolyse van een amidebinding in een -lactamring in een biomolecuul te katalyseren. Bacteriële productie van -lactamase is het belangrijkste mechanisme van bacteriële resistentie tegen -lactam-antibiotica. -lactamase-antibiotica waaronder penicillines, cefalosporines, atypische -lactams, enz., Zijn de meest gebruikte, de meest bestudeerde en de meest gebruikte geneesmiddelen. Basis informatie Specialistenclassificatie: inspectie en classificatie van infectieziekten: biochemisch onderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: niet vasten Tips: Afhankelijk van de voedingsstatus van het hele lichaam, worden melk, eieren, fruit, sojamelk, enz. In de maaltijd gegeven. Normale waarde Het type en aandeel van de flora in het lichaam zijn normaal en het menselijk lichaam is in een dynamisch evenwicht. Klinische betekenis Het mechanisme van bacteriële weerstand: 1. Geïnactiveerde enzymen - voornamelijk bèta-lactamasen (meer dan 200 soorten), waardoor antibiotica niet effectief zijn. 2, doelwitveranderingen - het doelwit verandert met antibiotica, zodat de rol van antibiotica afnam. 3, de verandering van bacteriële membraanpermeabiliteit - zodat antibiotica niet of zelden de bacteriën kunnen binnendringen om het doel te bereiken. De ontwikkeling van bacteriële resistentie van ziekenhuisstammen (zoals Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus) tot stammen buiten het ziekenhuis (zoals Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae), weerstand tegen resistentie tegen een enkel geneesmiddel Het medicijn ontwikkelt zich tot resistentie tegen meerdere geneesmiddelen, zoals Staphylococcus aureus-resistentie tegen penicilline; ESBL-stam is resistent tegen een verscheidenheid aan veelgebruikte antibiotica. Abnormale resultaten Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae en andere infecties, maar het gebruik van antibiotica is niet effectief of het effect is niet duidelijk, bacteriën produceren resistentie tegen geneesmiddelen. De mensen die onderzoek nodig hebben, hebben patiënten met de bovengenoemde aandoeningen. voorzorgsmaatregelen Ongepaste menigte: Nee. Verboden voor onderzoek: let op normale eetgewoonten en let op persoonlijke hygiëne. Vereisten voor inspectie: actief samenwerken met de arts. Inspectie proces Detectie van -lactamase In klinische specimens bleken Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae en enkele stammen van Enterococcus recent resistent te zijn tegen penicilline en ampicilline. Omdat de bovengenoemde stam P-lactamase produceert, wordt het bovengenoemde antibioticum gehydrolyseerd. De volgende methoden worden gebruikt om het enzym te detecteren: 1. Methode voor het verdwijnen van microbiële activiteit Deze methode is een indicatorstam van Bacillus subtilis die zeer gevoelig is voor penicilline. Als de te testen stam -lactamase produceert en penicilline vernietigt, is er Bacillus subtilis-groei aan beide zijden van de lijn, anders is de indicator nog steeds erg groot. Antibacteriële ring. 2, zetmeel-jodiumbepaling De beta-lactamase vernietigt de beta-lactamring en het jodium combineert met de geopende beta-lactamring om het blauwe zetmeel-jodiumcomplex om te zetten in kleurloos. METHODEN: Een suspensie van penicilline 6000 g / ml werd bereid met pH 6,0 fosfaatbufferoplossing. 0,1 ml van de oplossing werd in een putje van een microdilutieplaat geplaatst. Verschillende kolonies van de teststam werden geselecteerd en daarin gesuspendeerd, 30 minuten geschud en gedurende 1 uur bij kamertemperatuur bewaard. Voeg 2 druppels zetmeeloplossing toe, voeg 1 druppel jodiumoplossing toe, meng en observeer de kleurverandering onmiddellijk. Wanneer de positieve persoon jodiumoplossing toevoegt, zal deze onmiddellijk blauw verschijnen, zoals blauw binnen 10 minuten verdwijnen, wat suggereert dat de bacteriën -inwendig produceren lactamase. 3. Zuurmeting Penicilline wordt gehydrolyseerd door -endase tot penicillinezuur, de pH-waarde daalt onder 6,8, met fenolrode indicator, van rode (paarse) kleur (stockoplossing: citraatbuffer pH 8,5) geel (pH 6,8 Het volgende). 4, cefalosporine thiofeen kleurreactie De -lactamring van Nitrocefin wordt geopend door -lactamase en de matrix verandert van geel naar rood. Vloeibare methode: 10 mg cefanitrothiofeen werd opgelost in 1 ml dimethylsulfoxide en vervolgens 1:20 verdund met 0,1 mol / L PBS (pH 7,0), en uiteindelijk was de concentratie 500 g / ml, en de oplossing was geel of bleekoranje. Bewaar 4 tot 10 ° C gedurende enkele weken. Neem 0,05 ml van de oplossing in de put van de microverdunningsplaat of in de kleine reageerbuis, kies de kolonie van de test, maak een dikke suspensie, meng met de matrixvloeistof in het concave gat en verander de cefalosporine nitrothiophene van geel naar kamertemperatuur gedurende 10 tot 30 minuten. Rood is positief.Als de kleur niet duidelijk is, kan de observatie met 6 uur worden verlengd. Er is gemeld dat de resultaten van de papieren methode voor de detectie van -lactamase door Haemophilus influenzae en Neisseria gonorrhoeae nauwkeurig zijn, maar voor sommige stammen een kleine hoeveelheid -lactamase, die nauw is gebonden aan de bacteriecellen, zoals saprofytische Staphylococcus, enz., Beter volgens vloeibare methode. Kwaliteitscontrole wordt toegepast op elk van de bovenstaande detectiemethoden. Niet geschikt voor het publiek Over het algemeen geen taboes. Bijwerkingen en risico's Over het algemeen geen complicaties en schade.