chylomicronen

De chylomicronen zijn de grootste lipoproteïnedeeltjes in menselijk plasma, en CM is het grootste deel van TG in de voeding die wordt afgegeven vanuit de absorptieplaats van de dunne darm naar de systemische circulatie. De CM-clearingsnelheid is snel, de halfwaardetijd is 10 minuten en de normale persoon kan het na 12 uur vasten niet detecteren.Wanneer de lipoproteïne wordt geëlektroforeerd, is de CM aan de oorsprong. Opgemerkt moet worden dat het monster vers moet zijn tijdens serumlipoproteïne-elektroforese en niet bevroren moet worden bewaard. Basis informatie Specialistenclassificatie: classificatie van spijsvertering: bloedonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: Normaal. positief: Hyperlipoproteïnemie type I, hyperlipoproteïnemie type V. Tips: Voor het onderzoek is het dieet licht en is alcohol verboden. Normale waarde Negatief. Klinische betekenis Positieve hyperlipoproteïnemie type I, hyperlipoproteïnemie type V. Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: hyperlipoproteïnemie type I, hyperlipoproteïnemie type V voorzorgsmaatregelen 1. Immunoturbidimetrische turbiditeitsmethode: (1) Met betrekking tot antiserum: de turbidimetrische test heeft hogere vereisten voor antiserum dan andere methoden. De turbidimetrische methode is bij voorkeur een polyklonaal antilichaam. Anti-serum moet vrij zijn van anti-serum. Moet veel aandacht besteden aan het apoA-I dat is geëxtraheerd uit menselijk serum om immunopurity, chromatografische zuiverheid en zuiverheid van elektroforese te bereiken, wat niet mogelijk is in het algemene laboratorium. De antiserumtiter (titer) mag niet minder zijn dan 16. Momenteel heeft het apoA-I antiserum in sommige huishoudelijke commerciële reagentia een zeer lage titer, dus wees voorzichtig bij het kopen van de kit. Als u geen ervaring hebt met het identificeren van antisera-kwaliteit vóór aankoop, moet u de gekwalificeerde eenheid vragen om deze te identificeren. (2) Het monster in de bovenste methode (serum) wordt 200 keer verdund voor handmatige bediening (100 l monster) en als het een precisiemonster is, kan het 20 keer worden verdund (met 10 l). Om zich aan te passen aan de omstandigheden van verschillende laboratoria (zoals verschillende soorten geautomatiseerde instrumenten), moet bij het aanbrengen van de juiste aanpassingen aandacht worden besteed aan het aandeel antigeen-antilichaam. Met andere woorden, de hoeveelheid antiserum moet voldoende zijn, anders zijn de resultaten laag wanneer de apoA-I hoog in het monster is. Momenteel hebben sommige huishoudelijke medicijnkits niet alleen een lage anti-serum-titer, maar de dosering van de monsters in de operatie is te groot (zoals 3 ~ 5l), het antilichaam is duidelijk onvoldoende en de gemeten resultaten zijn onvermijdelijk onnauwkeurig. (3) Om een nauwkeurige meting te verkrijgen, moeten de kalibratiecurveberekeningsresultaten worden gemaakt in de apoA-I en B turbidimetrische meting (eindpuntmethode). Een bepaald bereik (lage monsterdosis) concentratie (X) is in principe lineair met troebelheid (Y), en lineaire regressie berekent een bepaald intercept op de Y-as (A-waarde <0,1), dus de afwijking van het berekeningsresultaat wordt berekend door eenpuntskalibratie. Groter, de gemeten resultaten kunnen het niveau van hoog (hoog laag, laag hoog) niet nauwkeurig weergeven. Verwaarloos de nauwkeurigheid van de meting niet vanwege de eenvoud van de single point-methode. Ongeacht het type geautomatiseerd instrument, moet u eerst de kalibratiecurve proberen. Als de test wordt herhaald onder de omstandigheden van het instrument en de specifieke omstandigheden, is het onderscheppen van de regressielijn niet duidelijk, dan kan de single point-kalibratiemethode worden gebruikt. Wanneer de hoeveelheid van het monster 3 tot 5 l is, zelfs als de hoeveelheid antiserum wordt verhoogd, zijn de concentratie en de troebelheid niet lineair en kunnen deze alleen worden berekend nadat de curve lineair is omgezet. (4) De belangrijkste interferentiefactor is de troebelheid van het serum zelf (zoals vetrijk serum) en de voorbehandelingsmethoden zoals ultracentrifugatie of lipasehydrolyse zijn niet praktisch. Het effect van troebelheid met oppervlakteactieve stoffen is ook beperkt, dus moet een blanco buis worden gemaakt in de test. Naast de tweepuntsmethode die bij geautomatiseerde analyse wordt gebruikt, is het een vergissing om handmatig een enkel reagens te gebruiken zonder de blanco af te trekken. Om het effect van matrixeffecten op de troebelheid te verminderen, moet serum met een vaste waarde als kalibrator worden gebruikt. Bovendien moet interferentie zoals stofdeeltjes en troebele schotelkrassen worden uitgesloten. (5) Sommige commerciële kits (waaronder enkele geïmporteerde producten) hebben onnauwkeurige kalibratiesera-waarden, die belangrijke bronnen van fouten zijn. 2. Raketelektroforese: (1) De selectie van de antigeenverdunningsfactor en de hoeveelheid antiserum moeten duidelijk zijn, de helling van de kalibratiecurve is matig en de uitlijningscurve is geschikt. De methode meet gelijktijdig apoA-I en apoB, en de hoeveelheid van de twee antisera moet worden aangepast zodat de piekhoogten van de twee verschillend zijn en de apoB-piekhoogte niet minder is dan 1 cm. (2) Antisera uit verschillende soorten bronnen (zoals konijnen en schapen), getest tegen de equivalente prijs, de resultaten zullen anders zijn. De apoA-I-test is bij voorkeur konijnenantiserum. Wanneer het konijnenserum wordt gebruikt, is de piekvorm scherp en is de piek die door het schapenserum wordt geproduceerd dik, is de piekpunt rond en stomp en verschijnt soms een spookbeeld vóór de piek. De helling van de kalibratiecurve voor het kalibratieserum is ook anders. Welke antiserum ook wordt gebruikt, de kwantitatieve resultaten verschillen niet veel. (3) Elektroforese onder bepaalde omstandigheden, de piekhoogte van het kalibratieserum van verschillende verdunningen zal niet significant veranderen, en de helling van de kalibratiecurve is in principe hetzelfde. Als de piekhoogte van het monster het kalibratiecurvebereik overschrijdt, moet de verdunningsfactor van het monster worden aangepast en opnieuw worden getest. Het interboard CV is meestal minder dan 5%. (4) Resultaten van raketelektroforese kunnen worden waargenomen door kleuring of directe visuele waarneming van de raketpiek. De eerste gebruikt minder exemplaren en bespaart antiserum, maar als de specimens en het antiserum op de juiste manier worden verhoogd, is het handiger om niet te kleuren. De gebruikte agarose moet standaard elektro-osmotisch of hypotoon zijn. Door de juiste hoeveelheid dextran of polyethyleenglycol aan de gel toe te voegen, wordt de raketpiek helderder. (5) De meting van de raketpiek kan het gebied of de piekhoogte berekenen, en het gebied is de piekhoogte vermenigvuldigd met de piekbreedte (de breedte op de halve hoogte van de piek). De meetnauwkeurigheid is bij voorkeur tot 0,1 mm. Er moeten mechanische of elektronische versterkingsapparatuur worden gebruikt. De piekhoogte in het bereik van de standaardcurve is bij voorkeur 1 tot 4 cm. (6) Deze wet is van toepassing op de analyse van een klein aantal specimens. Ook geschikt voor apoAII, CI, CII, CIII, D, E en Lp (a) bepaling. Inspectie proces 1. Immunoturbidimetrische turbiditeitsmethode: (1) Het monster moet een snel scheidend serum zijn dat op tijd kan worden gescheiden. Het kan in de koelkast bij 2 tot 6 ° C worden bewaard, binnen 1 week worden gemeten en een half jaar bij -20 ° C worden bewaard. (2) Bij gebruik van een volledig automatische analysator moeten de verhouding antigeen tot antilichaam en reactietijd redelijk worden gekozen op basis van verschillende parameters van het instrumentontwerp. Het kan ook worden gebruikt als een snelheidsspreiding nefelometrie CM zoals Beckman turbidimeter ICS of proteïnearray-systeem). (3) Instrumenten die worden gebruikt in de handmatige methode: precisie-fotometer met 340 nm filter (of splitter), het monstervolume is bij voorkeur 0,5 ml (om antiserum te besparen), bij voorkeur met stroombeker, de monsterverdunning kan het beste worden verdund Gecorrigeerde sampler. (4) Specimenbehandeling: het serummonster en het kwaliteitscontroleserum worden 1: 200 verdund met een monsterverdunningsmiddel, dat wil zeggen eerst verdund 1:20 (5,0 ul serum + 95 ul verdunningsmiddel) en vervolgens 1:10 verdund ( Overmaat 1:20 serum voor bepaling van apoB). Na mengen liet men het 30 min staan bij 25 tot 37 ° C en was het troebel bij een golflengte van 340 nm Het resultaat werd afgelezen op een standaardcurve volgens de A-waarde van U-UB. Deze methode heeft een CV van <5%. (5) Kalibratiecurve: voor elke batch van handmatige en semi-automatische werking is een kalibratiecurve vereist en het kalibratieserum kan worden verdund in vier concentraties van 1: 100, 1: 200, 1: 300 en 1: 400, die hetzelfde zijn als het monster. Bediening, bereken de CM-concentratie van elke standaardbuis volgens de vaste waarde en plot de concentratie (X) met de bijbehorende A-waarde (Y) (berekend door lineaire regressie), die in principe recht is, maar een bepaald onderschepping op de Y-as heeft. U kunt dus geen standaard met één punt gebruiken. Wanneer de bewerking nauwkeurig is, moet de correlatiecoëfficiënt tussen de concentratie en de A-waarde hoger zijn dan 0,985. Als er drie kalibratieserums zijn in hoge, gemiddelde en lage concentraties, kan deze op dezelfde manier worden gebruikt als het specimen en kan worden gebruikt voor driepuntskalibratie. Het kan ook worden gebruikt voor vijfpuntskalibratie (dwz serum met hoge middenconcentratie gelijkmatig mengen, medium en laag Concentraties van serum werden in gelijke hoeveelheden gemengd om de andere twee ijksera te worden). Het lineaire bereik van deze methode: 0.4 ~ 2.5g / L. 2. Raketelektroforese: (1) gietplaat: 10 g / l agarose 10 ml per plaat, smelten in kokend waterbad, goed mengen, voeg 50l CM antiserum en apoB antiserum 8l indien koud toe tot 50 ~ 55 ° C (de hoeveelheid hangt af van de antiserumtiter) ), meng en giet snel op de vooraf ingestelde glasplaat op het waterplatform, koel en plaats vervolgens bij 4 ° C, na 20 min, perforeer gaten, het gat bevindt zich aan het kathode-uiteinde van de plaat, de gatdiameter is 3 mm, de gatafstand is minimaal 5 mm en de gatcapaciteit is 5 l. Plaats de plaat in de elektroforesetank en overbrug met filterpapier. (2) Verdunning van antigeen: het kalibratieserum werd verdund tot 1: 100, 1: 150, 1: 200, 1: 300 en 1: 400 (voor kalibratiecurve) met 0,15 mol / L NaCl-oplossing, en het serummonster was 1: Verdund in 200, zet de koelkast maximaal 4 dagen op 4 ° C. (3) Laden: 5 ul (nauwkeurig) van het verdunde serum en monsters werden genomen in een lage stroomstatus (10 mA / plaat) en toegevoegd aan het agarosegelmonsterputje. Elk bord moet een reeks normen doen. (4) Power-on: constante stroom 24 mA / plaat, klemspanning 6 ~ 8V / cm, koeling met stromend water om agarose 15 ° C te houden, elektroforese 3 ~ 4h. (5) Deproteinisatie en droge film: de agaroseplaat werd na elektroforese 30 minuten ondergedompeld in 0,15 mol / l NaCl en de film werd op de polyesterfilm geplaatst en onder lichte druk onder een meerlagig filterpapier gedroogd. Het vocht in de lijm wordt vervolgens op natuurlijke wijze gedroogd met het filterpapier, de film en de polyesterfilm, of gedroogd met een heteluchtblazer Na het drogen wordt de film op natuurlijke wijze gescheiden van het filterpapier en de polyesterfilm. (6) Verven: de agarosefilm werd 20 tot 30 minuten ondergedompeld in de kleuroplossing. (7) Ontkleuring: Week de geverfde film met een ontkleuringsoplossing totdat de raketpiek helder is en de achtergrond in wezen kleurloos is. Het kan in twee stukken cellofaan in water worden geklemd en kan na het drogen lang worden bewaard. Het kan ook worden gedrenkt in stromend water om de achtergrond te verwijderen. OPMERKINGEN: 1 De verdunningsverhouding van het antigeen en de hoeveelheid antiserum moeten zo worden gekozen dat de raketpiek helder is, de helling van de kalibratiecurve matig is en de lijn geschikt is. De methode meet gelijktijdig apoA-I en apoB, en de hoeveelheid van de twee antisera moet worden aangepast zodat de piekhoogten van de twee verschillend zijn en de apoB-piekhoogte niet minder is dan 1 cm. 2 Verschillende soorten antiserums (zoals konijnen en schapen) worden getest tegen dezelfde prijs en de resultaten zullen verschillen. De apoA-I-test is bij voorkeur konijnenantiserum. Wanneer het konijnenserum wordt gebruikt, is de piekvorm scherp en is de piek die door het schapenserum wordt geproduceerd dik, is de piekpunt rond en stomp en verschijnt soms een spookbeeld vóór de piek. De helling van de kalibratiecurve voor het kalibratieserum is ook anders. Welke antiserum ook wordt gebruikt, de kwantitatieve resultaten verschillen niet veel. 3 Elektroforese onder bepaalde omstandigheden, de piekhoogte van het kalibratieserum van verschillende verdunningen zal niet significant veranderen en de helling van de kalibratiecurve is in principe hetzelfde. Als de piekhoogte van het monster het kalibratiecurvebereik overschrijdt, moet de verdunningsfactor van het monster worden aangepast en opnieuw worden getest. Het interboard CV is meestal minder dan 5%. 4 Raketelektroforese resultaten kunnen worden waargenomen door kleuring of directe visuele waarneming van de raketpiek. De eerste gebruikt minder exemplaren en bespaart antiserum, maar als de specimens en het antiserum op de juiste manier worden verhoogd, is het handiger om niet te kleuren. De gebruikte agarose moet standaard elektro-osmotisch of hypotoon zijn. Door de juiste hoeveelheid dextran of polyethyleenglycol aan de gel toe te voegen, wordt de raketpiek helderder. 5 De meting van de raketpiek kan het gebied of de piekhoogte berekenen, en het gebied is de piekhoogte vermenigvuldigd met de piekbreedte (de breedte op de halve hoogte van de piek). De meetnauwkeurigheid is bij voorkeur tot 0,1 mm. Er moeten mechanische of elektronische versterkingsapparatuur worden gebruikt. De piekhoogte in het bereik van de standaardcurve is bij voorkeur 1 tot 4 cm. 6 Deze methode is van toepassing op de analyse van een kleine hoeveelheid specimens. Ook geschikt voor apoAII, CI, CII, CIII, D, E en Lp (a) bepaling. Niet geschikt voor het publiek Geen. Bijwerkingen en risico's Geen.