Serum Lipoproteïne en Serum Lipoproteïne Elektroforese

Lipoproteïne-elektroforese wordt voornamelijk gebruikt voor de classificatie van hyperlipoproteïnemie, en het is ook nuttig om de bloedlipidenstatus van coronaire hartziekten te begrijpen en de klinische diagnose en behandeling beter te begeleiden. Basis informatie Specialistenclassificatie: cardiovasculair onderzoek classificatie: biochemisch onderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Gevonden in lage lipoproteïnemie enzovoort. Normale waarde: Lipoproteïne met zeer lage dichtheid: 0,06-0,3 g / l Lipoproteïne met lage dichtheid: 0-7 g / l Lipoproteïne met hoge dichtheid (mannelijk): 0,41-0,63 g / l Hoge dichtheid Zheng? .42-0.68g / L Boven normaal: Gevonden in primaire hyperlipidemie enzovoort. negatief: positief: Tips: Voor het onderzoek is het dieet licht en is alcohol verboden. Controleer 's ochtends op een lege maag. Normale waarde Celluloseacetaatmembraanelektroforese Distelmelkdeeltjes 0 g / l (0 mg / dl); Lipoproteïne met zeer lage dichtheid 0,06 - 0,3 g / l (6 - 30 mg / dl); Lipoproteïne met lage dichtheid <7 g / l (<700 mg / dl); Lipoproteïne met hoge dichtheid: Mannelijke 0,52 ± 0,11 g / l (43 ± 18 mg / dl); Vrouw 0,55 ± 0,13 g / l (47 ± 2 mg / dl). Klinische betekenis 1, verhoogd: waargenomen bij primaire hyperlipidemie. 2, lager: gezien bij lage lipoproteïnemie. Hoge resultaten kunnen ziekten zijn: hyperlipidemie, hyperlipoproteïnemie type II, overwegingen van hart- en vaatziekten 1. Monster: Lipoproteïne kan worden geïsoleerd uit vers, niet-bevroren serum. Plasma is niet geschikt voor lipoproteïne-elektroforese omdat een fibrinogeenband zal verschijnen. 2. Lipoproteïneprofielen met heldere scheidingscomponenten zijn voorwaarden voor nauwkeurige interpretatie. Als aan deze voorwaarden goed wordt voldaan, kunnen de lipoproteïne-elektroforese en de referentiemethode (ultracentrifugatie) behoorlijk consistent zijn. De precisie van elke component is anders en wordt geschat door de variatiecoëfficiënt, die in het algemeen minder dan 5% is. 3. Af en toe verdwijnen alfa-lipoproteïnen en / of verschijnt er een smalle alfa-lipoproteïnenband. Dit komt omdat er vrije vetzuren in zitten. Ophoping op alfa-lipoproteïnen zorgt ervoor dat deze deeltjes dezelfde lading hebben. Naarmate de dichtheid van de a-zone toeneemt, is het resultaat hoog. In vergelijking met precipitatietechnieken is kwantitatieve lipoproteïne-elektroforese duur. Inspectie proces Onmiddellijk na het verzamelen van veneus bloed, de test operatie: 1. Voeg de buffer toe aan de elektroforesetank en stel de buffer in de tanks aan beide kanten in om ze in hetzelfde vlak te maken. 2. Bereiding van celluloseacetaatfilm: Neem een celluloseacetaatfilm (2 cm x 8 cm) en teken een horizontale lijn met een potlood op 1,5 cm (één zijde van de negatieve zijde) van het ruwe oppervlak om een stippellijn te maken. Na nummering en aanduiding van de positieve en negatieve elektroden werd de film ondergedompeld in de barbituraat-barbital natriumbufferoplossing, en na voldoende verzadigd te zijn (gewoonlijk 20 min), werd de overtollige buffer verwijderd door het schone filterpapier te sandwichen. 3. Het celluloseacetaatfilmhaar wordt bevestigd aan de elektroforesetankhouder en rechtgetrokken. Pipetteer 3 ~ 5l niet-hemolytisch serum met een micropipet en voeg het toe langs de horizontale lijn op de horizontale lijn. Het monster moet op een bepaalde afstand van de rand van de film worden bewaard om vervorming van de eiwitband in het elektroforese-patroon te voorkomen. Nadat het serum in de film doordringt, wordt de film omgekeerd. Met de lichte kant naar boven, plak deze plat op de beugel van de elektroforesetank en verbind de twee uiteinden van de film met de buffer met dubbellaags filterpapier of vier lagen gaas en wacht even. 4, zet de stroom aan, let op de positieve en negatieve elektroden op de celluloseacetaatfilm, sluit niet verkeerd aan. Spanning 90 ~ 150V, stroom 0.4 ~ 0.6mA / cm (verschillende spanning vereist, stroom kan anders zijn, moet flexibel zijn), zomervermogen 45min, winterstroomtijd is iets langer, ongeveer 60min, uitbreiding van elektroforesezone ongeveer 25 ~ 35mm kan zijn. 5, verven: Nadat de stroom is voltooid, verwijder de film en dompel deze direct onder in de Lichunhong S-kleurstofoplossing of de aminozwarte 10B-kleuroplossing, kleur gedurende 5 tot 10 minuten (door de albuminezone) en spoel vervolgens de resterende spoelvloeistof. Kleur tot de achtergrond kleurloos is. 6, kwantitatief: 1 colorimetrische methode: dep de gespoelde film, snijd het geverfde eiwitgebied in de overeenkomstige buis, voeg 0,6 ml / l natriumhydroxide 6 ml in de albuminebuis toe (bereken de absorptie vermenigvuldigd met 2), de rest Voeg 3 ml toe aan elke buis, schud deze enkele keren en plaats deze 20 minuten in een watertank van 37 ° C om de kleur uit te lekken. Amino Black 10B kleuring De absorptie van elke buis werd afgelezen bij 620 nm met behulp van een spectrofotometer, en vervolgens werd de inhoud van elke buis berekend (gelijktijdige blanco buiscontrole). Toen de Lichunhong S werd geverfd, werd het percolaat behandeld met 0,1 mol / L natriumhydroxide en de hoeveelheid was dezelfde als hierboven. Voeg na 10 minuten 0,6 ml 400 ml / l azijnzuur toe aan de albuminebuis (vermenigvuldig de absorptie met 2) en voeg 0,3 ml toe aan de andere buizen om wat natriumhydroxide te neutraliseren om de kleur dieper te maken. Centrifugeer en neem de bovenstaande vloeistof indien nodig. De absorptie van elke buis werd afgelezen bij 520 nm door een spectrofotometer (gelijktijdige blanco controle) en vervolgens werd de respectieve inhoud berekend. 2 Densitometer-scanmethode: A. Transparant: zuig de spoelvloeistof op de film op (om te voorkomen dat de transparante vloeistof wordt verdund om het transparante resultaat te beïnvloeden), dompel de film 2 tot 3 minuten in de transparante vloeistof, verwijder hem en rol hem plat op een rollende manier. Reinig en krasvrij glazen objectglaasjes (maak geen bubbels), richt de objectglaasjes een tijdje op, verwijder overtollige transparante vloeistof, plaats in een oven op een constante temperatuur van 90-100 ° C, bak gedurende 10-15 minuten, verwijder en koel af tot kamertemperatuur. De eiwitgebieden transparant door deze methode zijn verschillend, de film is vlak en kan direct worden gescand en permanent geconserveerd (transparant met waterstofnaftaleen of vloeibare paraffine. De gespoelde film moet worden gedroogd en transparant, en de transparante film kan niet worden opgeslagen. Lang en gemakkelijk te kreuken). 2 Scanning kwantificering: de transparante film wordt in een volautomatische densitometer of andere donkere densitometer geplaatst voor scananalyse. Niet geschikt voor het publiek Ongepaste mensen: over het algemeen zijn er geen mensen die niet geschikt zijn. Bijwerkingen en risico's 1, lokale subcutane bloeding: na de bloedafname moet voldoende lang worden ingedrukt, vooral die met een neiging tot bloeden, om geen subcutane sijpeling en blauwe plekken te veroorzaken als gevolg van geen bloedstolling. 2, infectie: aandacht voor aseptische operatie tijdens veneuze bloedafname, om geen lokale infectie te veroorzaken.