apolipoproteïne AⅠ

Apolipoproteïne is een plasma-lipoproteïnefractie die een verscheidenheid aan lipoproteïnen en verschillende verschillende specifieke apolipoproteïnen bevat. Er zijn meer dan 20 soorten apolipoproteïnen die tot nu toe zijn ontdekt. Onder hen zijn er voornamelijk aPOA1, AII, B-100, B48, CI, CII, CIII, D, E en dergelijke. Basis informatie Specialistenclassificatie: cardiovasculair onderzoek classificatie: biochemisch onderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Tips: actief samenwerken met de arts tijdens het onderzoek. Normale waarde De immunoturbidimetrische methode was 1,01 tot 1,32 g / l. Raket immuno-elektroforese 1,02 ~ 1,36 g / L. Klinische betekenis Vermindering: hart- en vaatziekten, diabetes, nefrotisch syndroom, erfelijke ApoA-I-deficiëntie (ziekte van Tanger), familiale lage alfa-lipoproteïnemie, fisheye-ziekte, ernstige ondervoeding, actieve hepatitis en leverdisfunctie. Lage resultaten kunnen ziekten zijn: hart- en vaatziekten, voorzorgsmaatregelen tegen hepatitis 1. Immunoturbidimetrische turbiditeitsmethode: 1 Betreffende antiserum: de turbidimetrische test heeft hogere eisen aan antiserum dan andere methoden. De turbidimetrische methode is bij voorkeur een polyklonaal antilichaam. Anti-serum moet vrij zijn van anti-serum. Het is noodzakelijk om groot belang te hechten aan de apoAI geëxtraheerd uit menselijk serum om immunopurity, chromatografische zuiverheid en zuiverheid van elektroforese te bereiken, wat niet mogelijk is in het algemene laboratorium. De antiserumtiter (titer) mag niet minder zijn dan 16. Momenteel heeft het apoAI antiserum in sommige binnenlandse commerciële reagentia een zeer lage titer, dus u moet opletten bij de aankoop van de kit. Als u geen ervaring hebt met het identificeren van antisera-kwaliteit vóór aankoop, moet u de gekwalificeerde eenheid vragen om deze te identificeren. 2 Het bovenste standaardmonster (serum) wordt 200 keer verdund voor handmatige bediening (100 l monster), en als er een precisiemonster is, kan het 20 keer worden verdund (met 10 l). Om zich aan te passen aan de omstandigheden van verschillende laboratoria (zoals verschillende soorten geautomatiseerde instrumenten), moet bij het aanbrengen van de juiste aanpassingen aandacht worden besteed aan het aandeel antigeen-antilichaam. Met andere woorden, de hoeveelheid antiserum moet voldoende zijn, anders zijn de resultaten laag wanneer het apoAI-niveau hoog is in het monster. Momenteel hebben sommige huishoudelijke medicijnkits niet alleen een lage anti-serum-titer, maar de dosering van de monsters in de operatie is te groot (zoals 3 ~ 5l), het antilichaam is duidelijk onvoldoende en de gemeten resultaten zijn onvermijdelijk onnauwkeurig. 3 Om een nauwkeurige meting te bereiken, moeten de kalibratiecurveberekeningsresultaten worden gemaakt in de apoAI- en B-troebelheidsmeting (eindpuntmethode). Een bepaald bereik (lage monsterdosis) concentratie (X) is in principe lineair met troebelheid (Y), en lineaire regressie berekent een bepaald intercept op de Y-as (A-waarde <0,1), dus de afwijking van het berekeningsresultaat wordt berekend door eenpuntskalibratie. Groter, de gemeten resultaten kunnen het niveau van hoog (hoog laag, laag hoog) niet nauwkeurig weergeven. Verwaarloos de nauwkeurigheid van de meting niet vanwege de eenvoud van de single point-methode. Ongeacht het type geautomatiseerd instrument, moet u eerst de kalibratiecurve proberen. Als de test wordt herhaald onder de omstandigheden van het instrument en de specifieke omstandigheden, is het onderscheppen van de regressielijn niet duidelijk, dan kan de single point-kalibratiemethode worden gebruikt. Wanneer de hoeveelheid van het monster 3 tot 5 l is, zelfs als de hoeveelheid antiserum wordt verhoogd, zijn de concentratie en de troebelheid niet lineair en kunnen deze alleen worden berekend nadat de curve lineair is omgezet. 4 De belangrijkste interferentiefactor is de troebelheid van het serum zelf (zoals vetrijk serum) en de voorbehandelingsmethoden zoals ultracentrifugatie of lipasehydrolyse zijn niet praktisch. Het effect van troebelheid met oppervlakteactieve stoffen is ook beperkt, dus moet een blanco buis worden gemaakt in de test. Naast de tweepuntsmethode die bij geautomatiseerde analyse wordt gebruikt, is het een vergissing om handmatig een enkel reagens te gebruiken zonder de blanco af te trekken. Om het effect van matrixeffecten op de troebelheid te verminderen, moet serum met een vaste waarde als kalibrator worden gebruikt. Bovendien moet interferentie zoals stofdeeltjes en troebele schotelkrassen worden uitgesloten. 5 Sommige commerciële kits (inclusief sommige geïmporteerde producten) met onnauwkeurige kalibratieserawaarden zijn een belangrijke bron van fouten. 2. Raketelektroforese: 1 De verdunningsverhouding van het antigeen en de hoeveelheid antiserum moeten zo worden gekozen dat de raketpiek helder is, de helling van de kalibratiecurve matig is en de lijn geschikt is. De methode meet gelijktijdig apoAI en apoB en moet de hoeveelheid van de twee antiserums zodanig aanpassen dat de piekhoogten van de twee verschillend zijn en de apoB-piekhoogte niet minder is dan 1 cm. 2 Verschillende soorten antiserums (zoals konijnen en schapen) worden getest tegen dezelfde prijs en de resultaten zullen verschillen. De apoAI-test is bij voorkeur konijnenantiserum. Wanneer het konijnenserum wordt gebruikt, is de piekvorm scherp en is de piek die door het schapenserum wordt geproduceerd dik, is de piekpunt rond en stomp en verschijnt soms een spookbeeld vóór de piek. De helling van de kalibratiecurve voor het kalibratieserum is ook anders. Welke antiserum ook wordt gebruikt, de kwantitatieve resultaten verschillen niet veel. 3 Elektroforese onder bepaalde omstandigheden, de piekhoogte van het kalibratieserum van verschillende verdunningen zal niet significant veranderen en de helling van de kalibratiecurve is in principe hetzelfde. Als de piekhoogte van het monster het kalibratiecurvebereik overschrijdt, moet de verdunningsfactor van het monster worden aangepast en opnieuw worden getest. Het interboard CV is meestal minder dan 5%. 4 Raketelektroforese resultaten kunnen worden waargenomen door kleuring of directe visuele waarneming van de raketpiek. De eerste gebruikt minder exemplaren en bespaart antiserum, maar als de specimens en het antiserum op de juiste manier worden verhoogd, is het handiger om niet te kleuren. De gebruikte agarose moet standaard elektro-osmotisch of hypotoon zijn. Door de juiste hoeveelheid dextran of polyethyleenglycol aan de gel toe te voegen, wordt de raketpiek helderder. 5 De meting van de raketpiek kan het gebied of de piekhoogte berekenen, en het gebied is de piekhoogte vermenigvuldigd met de piekbreedte (de breedte op de halve hoogte van de piek). De meetnauwkeurigheid is bij voorkeur tot 0,1 mm. Er moeten mechanische of elektronische versterkingsapparatuur worden gebruikt. De piekhoogte in het bereik van de standaardcurve is bij voorkeur 1 tot 4 cm. 6 Deze methode is van toepassing op de analyse van een kleine hoeveelheid specimens. Ook geschikt voor apoAII, CI, CII, CIII, D, E en Lp (a) bepaling. Inspectie proces Raketelektroforese 1 schenkplaat: 10 g / l agarose 10 ml per plaat, smelten in kokend waterbad, mengen, koud tot 50 ~ 55 ° C bij toevoeging van apoAI antiserum 50l, apoB antiserum 8l (hoeveelheid afhankelijk van antiserumtiter) Meng snel en giet op de vooraf ingestelde glasplaat op het waterplatform, koel af en plaats bij 4 ° C en pons vervolgens gaten na 20 min. Het gat bevindt zich aan het kathode-uiteinde van de plaat, de gatdiameter is 3 mm, de gatafstand is minimaal 5 mm en het gatvolume is 5 l. Plaats de plaat in de elektroforesetank en overbrug met filterpapier. 2 verdund antigeen: het kalibratieserum werd verdund tot 1: 100, 1: 150, 1: 200, 1: 300 en 1: 400 (voor kalibratiecurve) met 0,15 mol / L NaCl-oplossing, en het serummonster werd 1: 200 verdund. Zet de koelkast niet langer dan 3 dagen op 4 ° C. 3 Laden: Verdun in de lage stroomstatus (10 mA / plaat) het gefixeerde serum en de monsters om 5 l (nauwkeurig) te absorberen en voeg dit goed toe aan het agarosegelmonster. Elk bord moet een reeks normen doen. 4 power: constante stroom 24mA / board, terminal spanning 6 ~ 8V / cm, koeling met stromend water om agarose 15 ° C te houden, elektroforese 3 ~ 4h. 5 eiwitvrij en droge film: de agaroseplaat na elektroforese werd 30 minuten ondergedompeld in 0,15 mol / L NaCl en de film werd op de polyesterfilm geplaatst en de lijm werd onder zachte druk door het meerlagige filterpapier geabsorbeerd. Vocht, droog dan het filterpapier, de film en de polyesterfilm samen, of droog het met een heteluchtblazer. Na het drogen zal de film op natuurlijke wijze scheiden van het filterpapier en de polyesterfilm. 6 kleuring: de agarosefilm werd 20 tot 30 minuten in de kleuroplossing ondergedompeld. 7 Ontkleuring: Week de geverfde film met een ontkleuringsoplossing tot de raketpiek helder is en de achtergrond in wezen kleurloos is. Het kan in twee stukken cellofaan in water worden geklemd en kan na het drogen lang worden bewaard. Het kan ook worden gedrenkt in stromend water om de achtergrond te verwijderen. OPMERKINGEN: 1 De verdunningsverhouding van het antigeen en de hoeveelheid antiserum moeten zo worden gekozen dat de raketpiek helder is, de helling van de kalibratiecurve matig is en de lijn geschikt is. De methode meet gelijktijdig apoAI en apoB en moet de hoeveelheid van de twee antiserums zodanig aanpassen dat de piekhoogten van de twee verschillend zijn en de apoB-piekhoogte niet minder is dan 1 cm. 2 Verschillende soorten antiserums (zoals konijnen en schapen) worden getest tegen dezelfde prijs en de resultaten zullen verschillen. De apoAI-test is bij voorkeur konijnenantiserum. Wanneer het konijnenserum wordt gebruikt, is de piekvorm scherp en is de piek die door het schapenserum wordt geproduceerd dik, is de piekpunt rond en stomp en verschijnt soms een spookbeeld vóór de piek. De helling van de kalibratiecurve voor het kalibratieserum is ook anders. Welke antiserum ook wordt gebruikt, de kwantitatieve resultaten verschillen niet veel. 3 Elektroforese onder bepaalde omstandigheden, de piekhoogte van het kalibratieserum van verschillende verdunningen zal niet significant veranderen en de helling van de kalibratiecurve is in principe hetzelfde. Als de piekhoogte van het monster het kalibratiecurvebereik overschrijdt, moet de verdunningsfactor van het monster worden aangepast en opnieuw worden getest. Het interboard CV is meestal minder dan 5%. 4 Raketelektroforese resultaten kunnen worden waargenomen door kleuring of directe visuele waarneming van de raketpiek. De eerste gebruikt minder exemplaren en bespaart antiserum, maar als de specimens en het antiserum op de juiste manier worden verhoogd, is het handiger om niet te kleuren. De gebruikte agarose moet standaard elektro-osmotisch of hypotoon zijn. Door de juiste hoeveelheid dextran of polyethyleenglycol aan de gel toe te voegen, wordt de raketpiek helderder. 5 De meting van de raketpiek kan het gebied of de piekhoogte berekenen, en het gebied is de piekhoogte vermenigvuldigd met de piekbreedte (de breedte op de halve hoogte van de piek). De meetnauwkeurigheid is bij voorkeur tot 0,1 mm. Er moeten mechanische of elektronische versterkingsapparatuur worden gebruikt. De piekhoogte in het bereik van de standaardcurve is bij voorkeur 1 tot 4 cm. 6 Deze methode is van toepassing op de analyse van een kleine hoeveelheid specimens. Ook geschikt voor apoAII, CI, CII, CIII, D, E en Lp (a) bepaling. Niet geschikt voor het publiek Ongepaste mensen: over het algemeen zijn er geen mensen die niet geschikt zijn. Bijwerkingen en risico's Over het algemeen heeft dit onderzoek niet teveel bijwerkingen en heeft het niet veel invloed op het lichaam.