telomerase

Telomerase is een speciale reverse transcriptase bestaande uit RNA en eiwit dat betrokken is bij de synthese van telomeren (een specifieke nucleotidesequentie en -structuur) aan de DNA-uiteinden van eukaryotische cellen. De telomeerlengte van normale somatische cellen wordt geleidelijk verkort naarmate de cel zich deelt, en de telomerase-activiteit wordt verbeterd, en de lengte van de telomeer kan worden gehandhaafd zonder verkorting, zodat de cellen kunnen prolifereren en kanker worden. Daarom kan telomerase-detectie en zijn remmers worden gebruikt voor tumordiagnose en -behandeling. Basis informatie Specialistenclassificatie: Oncologie-onderzoeksclassificatie: immuunonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: niet vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: Normaal negatief. positief: Kleincellige longkanker heeft de telomerase-activiteit in het vroege stadium verhoogd en niet-kleincellige longkanker heeft meer activiteitsveranderingen dan in het middenstadium. Tips: Houd een normale mindset aan. Normale waarde Negatief. Klinische betekenis Het is geschikt voor de diagnose en differentiële diagnose van verschillende tumorziekten. Hoogte: leverkanker (93,88 OD / 30 g eiwit), kanker rond weefsel (24,09 OD / 30 g eiwit). Kleincellige longkanker heeft de telomerase-activiteit in het vroege stadium verhoogd en niet-kleincellige longkanker heeft meer activiteitsveranderingen dan in het middenstadium. Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: voorzorgsmaatregelen voor pancreaskanker en schildklierkanker 1. Let op om laboratoriumbesmetting en vals-positief of vals-negatief te voorkomen. 2. Let op om de polymeraseremmer in het weefselmonster te verwijderen om valse negatieven te verminderen. 3. Scintillatieanalysetechnologie, ELISA-methode, in situ hybridisatiemethode zijn betrouwbaarder dan TRAP-methode. Inspectie proces Onmiddellijk nadat de bloedmonsters zijn verzameld, worden ze opgestuurd voor onderzoek en tumorimmunotest. Detectie operatie: Genomisch DNA was 0,1 g, buffer met 50 mmol / L kaliumchloride, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L magnesiumchloride, 100 g gelatine, elke primer was 0,25 mol / L; dATP, dCTP, dGTP De dTIP was 200 mol / L elk, de DNA-polymerase was 2,5 U en het uiteindelijke volume was 100 l. Voeg een paar druppels vloeibare paraffine toe om verdamping te voorkomen. Reactiecyclus: 1 denaturatie: 90 ° C gedurende 30-60 s, gloeitemperatuur van 2 primers en matrijs: 40-60 ° C 30-60 s, 3 verlenging: 72 ° C 1-2 min. Na herhaalde cycli van 30 tot 40 keer werd de laatste primerverlenging van 7 ° 72 ° C gedurende 7 minuten beëindigd. Na verwijdering van de vloeibare paraffine is het product beschikbaar voor analyse. Na elektroforese op agarosegel werd deze gekleurd met ethidiumbromide en werd een fluorescerende strip van verwachte amplificatielengte waargenomen door bestraling met een UV-lamp. Het product kan ook worden gehybridiseerd met een Southern-blot of een vlekblot met een radioactief gemerkte of niet-radioactief gemerkte oligonucleotide-probe. Het is handiger om het automatische PCR-instrument te gebruiken Na het toevoegen van het reactiereagens, het DNA-sjabloon en Taq-DNA-polymerase aan de reageerbuis, wordt het in de aangepaste procedure geplaatst, dat wil zeggen de vereiste temperatuur, tijd en verlenging van de respectieve temperatuur en tijd en het aantal cycli. De reactie wordt uitgevoerd in een automatisch instrument om een bevredigend amplificatieproduct te verkrijgen. Niet geschikt voor het publiek Degenen die geen indicatie voor onderzoek hebben, mogen niet worden getest. Bijwerkingen en risico's 1. Infectie: let op aseptische werking bij het verzamelen van bloed, vermijd besmetting van water en andere delen op de bloedafnameplaats om lokale infectie te voorkomen. 2, bloeden: nadat het bloed een volledige compressietijd heeft gekregen, vooral coagulopathie, neiging tot bloeden, om lokaal subcutaan lekken, blauwe plekken en zwelling te voorkomen.