Telomerase-activiteit

Telomeren zijn een speciale structuur aan het einde van een chromosoom in eukaryoten en bestaan uit een zich herhalende DNA-sequentie rijk aan guanine en de bijbehorende eiwitten. Telomeren zijn essentieel voor de stabiliteit van chromosoomuiteinden. Handhaving van telomeerlengte vereist de aanwezigheid van telomerase-activiteit. Endogene cytokines spelen een belangrijke rol bij de overleving op lange termijn van geïmmortaliseerde cellen en tumorcellen. Telomerase is een complex van RNA en eiwit.Het is een specifieke RNA-afhankelijke reverse transcriptase.Het kan telomeer DNA aan het einde van het chromosoom synthetiseren uit zijn eigen RNA om telomeer goed te maken tijdens celdeling. Verlies van DNA, behoud van de lengte van telomeren, onderhoudt het dynamische evenwicht van chromosomen en maakt cellen onsterfelijk. Sinds de oprichting van zeer gevoelige op PCR gebaseerde methoden voor het detecteren van telomerase, heeft telomerase veel aandacht getrokken. Gebleken is dat telomerase een nauwe relatie heeft met celproliferatie, differentiatie en onsterfelijkheid en een van de hotspots is geworden van fundamenteel onderzoek naar tumor en veroudering. Basis informatie Specialistenclassificatie: Oncologie-onderzoeksclassificatie: immuunonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: niet vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: De normale waarde is negatief. positief: (1) Patiënten met leverkanker hebben een hoger telomerase-positief percentage (85%). (2) Telomerase komt in hoge mate tot expressie in de meeste kwaadaardige tumorweefsels, zoals neuroblastoom (94%), borstkanker (93%), colorectale kanker (93%), maagkanker (85%), prostaatkanker. (84%), longkanker (80%), enz. Telomerase-activiteit hangt nauw samen met het klinische stadium en de prognose van de tumor. (3) Er kan een zwakke telomerase-activiteit zijn in enkele goedaardige laesies (zoals hepatitis, cirrose, goedaardig meningioom, enz.). Tips: er kan een zwakke telomerase-activiteit zijn in enkele goedaardige laesies (zoals hepatitis, cirrose, goedaardig meningioom, enz.). Normale waarde Negatief. Klinische betekenis 1, leverkankerpatiënten hebben een hoger telomerase-positief percentage (85%), telomerase-activiteit positieve AFP-waarden zijn aanzienlijk hoger dan telomerase-activiteit negatief. Telomerase-activiteit was niet significant geassocieerd met tumorgrootte, histologische graad en tumormetastase. Telomerase kan een tumormarker zijn voor de diagnose van leverkanker. 2. Telomerase komt in hoge mate tot expressie in de meeste kwaadaardige tumorweefsels, zoals neuroblastoom (94%), borstkanker (93%), colorectale kanker (93%), maagkanker (85%) en prostaatkanker ( 84%), longkanker (80%), enz. Telomerase-activiteit hangt nauw samen met het klinische stadium en de prognose van de tumor. Daarom is telomerase momenteel de meest specifieke en universele tumormarker. 3. Er kan een zwakke telomerase-activiteit zijn in enkele goedaardige laesies (zoals hepatitis, cirrose, goedaardig meningioom, enz.). Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: neuroblastoom, colorectale kanker, borstkanker, maagkanker, leverkanker, prostaatkanker, darmkanker, niercelcarcinoom, schildklierkanker In de afgelopen jaren is de "telomeer, telomerase-hypothese" bevestigd door steeds meer onderzoek, waarbij telomerase-activiteitsniveau wordt gebruikt als een biomarker en prognostische indicator voor tumordiagnose. 1. Let op om laboratoriumbesmetting en vals-positief of vals-negatief te voorkomen. 2. Let op om de polymeraseremmer in het weefselmonster te verwijderen om valse negatieven te verminderen. 3. Scintillatieanalysetechnologie, ELISA-methode, in situ hybridisatiemethode zijn betrouwbaarder dan TRAP-methode. Inspectie proces Controleer de werking: Genomisch DNA was 0,1 g; buffer met 50 mmol / L kaliumchloride, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L magnesiumchloride, 100 g gelatine; elke primer was 0,25 mol / L; dATP, dCTP, dGTP De dTIP was 200 mol / l elk; de DNA-polymerase was 2,5 U en het uiteindelijke volume was 100 l. Voeg een paar druppels vloeibare paraffine toe om verdamping te voorkomen. Reactiecyclus: 1 denaturatie: 90 ° C 30 ~ 60 s; 2 primer en matrijs gloeitemperatuur: 40 ~ 60 ° C 30 ~ 60s; 3 verlenging: 72 ° C 1-2 min. Na herhaalde cycli van 30 tot 40 keer werd de laatste primerverlenging van 7 ° 72 ° C gedurende 7 minuten beëindigd. Na verwijdering van de vloeibare paraffine is het product beschikbaar voor analyse. Na elektroforese op agarosegel werd deze gekleurd met ethidiumbromide en werd een fluorescerende strip van verwachte amplificatielengte waargenomen door bestraling met een UV-lamp. Het product kan ook worden gehybridiseerd met een Southern-blot of een vlekblot met een radioactief gemerkte of niet-radioactief gemerkte oligonucleotide-probe. Het is handiger om het automatische PCR-instrument te gebruiken Na het toevoegen van het reactiereagens, het DNA-sjabloon en Taq-DNA-polymerase aan de reageerbuis, wordt het in de aangepaste procedure geplaatst, dat wil zeggen de vereiste temperatuur, tijd en verlenging van de respectieve temperatuur en tijd en het aantal cycli. De reactie wordt uitgevoerd in een automatisch instrument om een bevredigend amplificatieproduct te verkrijgen. Niet geschikt voor het publiek Degenen die geen geschikte test hebben, mogen niet worden getest. Bijwerkingen en risico's 1. Infectie: let op aseptische werking bij het verzamelen van bloed, vermijd besmetting van water en andere delen op de bloedafnameplaats om lokale infectie te voorkomen. 2, bloeden: nadat het bloed een volledige compressietijd heeft gekregen, vooral coagulopathie, neiging tot bloeden, om lokaal subcutaan lekken, blauwe plekken en zwelling te voorkomen.