fibrinopeptide A

Fibrinopepide-A (FPA) is een splitsing van de peptideketen tussen sperma-16 en glycine-17 van fibrinogeen a (A) -keten onder invloed van trombine en bestaat uit 1 tot 16 aminozuren. Fibrin-peptide A. Het is een betrouwbare indicator van de stollingsactiviteit in het lichaam en de uiteindelijke vorming van trombus in fibrine. Verhoogde plasma-FPA-waarden weerspiegelen coagulatiesysteemactivering en trombinegeneratie. Daarom wordt het gevonden in hypercoaguleerbare toestand en trombotische ziekte, identificatie van primaire en secundaire fibrinolyse en monitoringindicatoren tijdens antistollingstherapie. Basis informatie Specialistenclassificatie: classificatie van groei- en ontwikkelingsonderzoek: bloedonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Tips: Bloedafname mag niet> 45s zijn en de eerste 2 ml moet worden weggegooid.De spuit moet een silicided of plastic spuit zijn. Normale waarde 1,2 ± 0,8 g / L. Klinische betekenis Verhoogde plasma-FPA-waarden weerspiegelen coagulatiesysteemactivering en trombinegeneratie. Daarom wordt het gevonden in hypercoaguleerbare toestand en trombotische ziekte, identificatie van primaire en secundaire fibrinolyse en monitoringindicatoren tijdens antistollingstherapie. Hoge resultaten kunnen ziekten zijn: verspreide intravasculaire coagulatie bij kinderen, zwangerschap met trombotische ziekte, verspreide intravasculaire coagulatie bij ouderen (1) De bloedafname moet soepel zijn en mag niet> 45 sec zijn, en de eerste 2 ml moet worden weggegooid.De spuit moet een siliconen of plastic spuit zijn. (2) Spuit onmiddellijk na bloedafname in de reageerbuis met anticoagulans en meng het snel in ijswater. Als het moet worden bewaard, is het geschikter bij -20 ° C na adsorptiebehandeling met bentoniet. Inspectie proces (1) Verzameling van plasmamonsters: 4,5 ml veneus bloed werd soepel afgenomen met een plastic spuit (de eerste 2 ml werd weggegooid) en een reageerbuis met 0,5 ml anticoagulans (heparine natrium 500u en aprotinine 5000u) werd toegevoegd en onmiddellijk gemengd. Centrifugeer gedurende 20 minuten met 3000 omw / min, scheid het plasma en trek het bovenste plasma naar een andere buis voor onmiddellijke behandeling of opslag bij -20 ° C. (2) Bentoniet-adsorptiebehandeling van plasmamonsters: het doel is om fibrinogeen volledig te verwijderen. 40 mg bentoniet werd toegevoegd aan een polypropyleen centrifugebuis van 45 ml, 0,5 ml adsorptiebuffer werd toegevoegd en het mengsel werd grondig gemengd. 1 ml plasma werd toegevoegd, geschud en gemengd op een cycloonmixer en langzaam gedurende 10 minuten geschud. Centrifugeer 15 min met 5000 r / min, zuig de bovenstaande vloeistof op in een andere buis en behandel deze vervolgens eenmaal met de bentoniet zoals hierboven beschreven. Vervolgens werd 1 ml van de bovenstaande vloeistof afgezogen en toegevoegd aan een reageerbuis die 50 ul van een 20 g / LTween 20-oplossing bevatte, en gemengd. Het uiteindelijke monster is 20 keer verdund. (3) FPA-coating: 1 ug / ml FPA werd opgelost in coatingbuffer, polystyreenreactieplaat werd toegevoegd, 200 ul / putje, afgedekt en overnacht bij 37 ° C. Het gat werd de volgende dag weggegooid. De plaat werd 5 keer gewassen met wasoplossing, telkens 3 minuten, gedroogd en gespaard. (4) FPA-standaard: 6 soorten verschillende concentraties zoals 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 ng / ml. 0,9 ml werd afzonderlijk opgezogen in een reeks kleine reageerbuisjes en 0,1 ml werkconcentratie konijn anti-menselijk FPA werd aan elke buis toegevoegd. De plasmamonsters die door de bentoniet-adsorptiebehandeling moesten worden getest, werden zoals hierboven gebruikt en de concentraties van 1: 2, 1: 4 keer waren zoals hierboven. Elk van de bovengenoemde buizen liet men 3 uur reageren bij 37 ° C. (5) 200 ul van elk van de bovengenoemde buizen nadat de incubatie was gepipetteerd in elk putje van de gecoate FPA, en de plaat werd 2 uur bij 37 ° C geïncubeerd, 5 keer gewassen en gedroogd. (6) Elk putje werd toegevoegd met HRP-geit anti-konijn IgG (verdund tot de werkconcentratie door standaard verdunning) 200 ul / putje, en de plaat werd 2 uur bij 37 ° C geïncubeerd, 5 keer gewassen en gedroogd. (7) Voeg 200 ul van de vers bereide substraatoplossing toe aan elk putje, en reageer nauwkeurig bij 37 ° C gedurende 3 minuten in het donker, en voeg onmiddellijk 3 mol / L H2SO450 ul toe aan elk putje om de reactie te beëindigen. De A-waarde (492 nm) van elk putje werd bepaald op het enzymlabel. Niet geschikt voor het publiek Hemofilie en diffuse intravasculaire coagulatie. Bijwerkingen en risico's Risico op infectie: als u een onreine naald gebruikt, loopt u mogelijk het risico op infectie.