Immunologische tests voor onvruchtbaarheid

Immunologische onderzoeken van onvruchtbaarheid omvatten mannelijke anti-sperma auto-immuun onvruchtbaarheid, vrouwelijke anti-sperma allogene onvruchtbaarheid en vrouwelijke anti-Zona pellucida onvruchtbaarheid. Controledieet: 1, de meeste testonderdelen vereisen 's ochtends bloedmonsters op een lege maag, moeten nuchtere koffie, sterke thee, suiker en cola-dranken zijn; 2, leverfunctie, bloedlipiden, bloedstolling en andere items vereisen 12-16 uur vasten, en Diner een dag van tevoren moet het drinken van alcohol vermijden, een vetrijk, eiwitrijk dieet verbieden; 3, dieet heeft een significante invloed op de bloedlipidetest, ten minste binnen 3 dagen voordat het bloed trekt om aandacht te besteden aan een normaal dieet. Basis informatie Specialistenclassificatie: eugenetica en superioriteitsonderzoek classificatie: lichaamsvloeistofonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: Het resultaat van de negatieve test moet normaal zijn. positief: Een positieve test geeft een ziekte aan die onvruchtbaar kan zijn. Tips: Stop geslachtsgemeenschap gedurende 4 tot 7 dagen. Testosteronpropionaat, testosteronfenylacetaat en nantrolonfenylpropionaat konden 1 week voor de test niet worden gebruikt. Normale waarde De resultaten van verschillende immunologische tests waren normaal en negatief. Klinische betekenis Abnormale resultaten Meerdere immunologische tests wijzen op onvruchtbaarheid. De mannelijke onvruchtbaarheid en vrouwelijke onvruchtbaarheid patiënten moeten worden onderzocht. Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: onvruchtbaarheid, mannelijke onvruchtbaarheid, vrouwelijke pseudohermaphroditism, voorzorgsmaatregelen voor genitale mannelijkheid Ongepaste mensen: nog niet bekend. Taboe vóór inspectie: Ten eerste, bij het verzamelen van sperma: 1. Voordat het sperma wordt verlaten, moet de patiënt 4 tot 7 dagen stoppen met de geslachtsgemeenschap. Testosteronpropionaat, testosteronfenylacetaat en nantrolonfenylpropionaat konden 1 week voor de test niet worden gebruikt. Het drinken moet binnen 1 maand voor de test worden gestopt, dit moet gebeuren. 2, wanneer het nemen van sperma, zachte zeep of paraffineolie kan worden gebruikt voor penismassage, worden de monsters verzameld in steriele reageerbuizen; condooms kunnen worden gebruikt (schoongewassen, geen zaaddodende medicijnen) of sperma kan worden verzameld door geslachtsgemeenschap, maar op deze manier De verzamelde hoeveelheid is vaak klein. 3. Als het sperma niet volgens de bovenstaande methode wordt verkregen, kunnen de zaadblaasjes en het uiteinde van de zaadleider worden gemasseerd door het rectum en kan de urine worden verzameld om te controleren of er sperma in het sediment zit. 4. Stel sperma niet bloot aan oververhitte en koude omgevingen. Overhandig het aan de arts voor referentie, niet meer dan 30 minuten. Blijf warm bij koud weer en bewaar het in je ondergoedzak wanneer je het verzendt. 5. Als een bacteriecultuur moet worden uitgevoerd, moet de urethrale opening worden gespoeld en gedesinfecteerd en moet het sperma worden verzameld in een steriele reageerbuis. Ten tweede, vóór de vereisten voor serumverzameling: (1) Dieet beheersen 1. De meeste inspectie-items vereisen 's ochtends bloedafname op een lege maag. Koffie, thee, suiker en cola dranken moeten worden vastgemaakt. 2, leverfunctie, bloedlipiden, bloedstolling en andere items vereisen 12-16 uur vasten, en een dag vóór het avondeten moet vermijden drinken, een vetrijk, eiwitrijk dieet verbieden. 3, dieet heeft een significante invloed op bloedlipiden testen, ten minste binnen 3 dagen voordat het bloed trekt om aandacht te besteden aan het handhaven van een normaal dieet. (B) om effecten van geneesmiddelen te voorkomen De effecten van geneesmiddelen op biochemische tests en bacteriekweek zijn complex. Daarom moet de proefpersoon, indien mogelijk, 1-2 dagen vóór de test stoppen met het nemen van alle medicijnen. Als medicatie nodig is voor de behandeling, moeten de effecten van het medicijn worden overwogen bij het analyseren van de resultaten van de test. (3) Het vermijden van de impact van oefeningen 1, zware inspanning kan veel bloedcomponenten doen veranderen, zelfs voor meer dan 24 uur, dus na krachtige oefening moet u niet onmiddellijk bloed afnemen en snel lopen, ten minste 10-15 minuten na rust, en dan bloed nemen. 2, moet in een kalme staat zijn om bloed te trekken, om emotionele opwinding te voorkomen. Vereisten voor inspectie: 1. Om ervoor te zorgen dat u de resultaten van uw lichamelijk onderzoek na het medisch onderzoek nauwkeurig kunt begrijpen, vult u het medisch onderzoekformulier en elk testblad zorgvuldig in vóór het medisch onderzoek. Het schrift moet duidelijk zijn, met name de naam. 2, na het nemen van serum, moet u 15-20 minuten stil zitten. Inspectie proces -, anti-sperma immuun onvruchtbaarheid controle Antispermimmuniteit omvat anti-sperma humorale immuniteit (anti-sperma antilichamen) en anti-spermacelimmuniteit. (1) Detectie van anti-sperma antilichamen 1. Test na geslachtsgemeenschap: Neem baarmoederhalsslijm binnen 6 ~ 24 uur na geslachtsgemeenschap en observeer het aantal zaadcellen geteld onder high power microscoop. In elk veld met hoog vermogen zijn er 21 extreem levendige spermaspecifieke factoren. Als de serumtiter 1: 32 is, kan worden aangenomen dat deze sperma-antilichamen bevat. Anderen hebben capillaire agglutinatie en plaatagglutinatie, die minder worden gebruikt. 2. Complement-afhankelijke cytotoxiciteitstest en sperma-remtest: Sperma-antilichaam bindt aan sperma-antigeen, activeert het complementsysteem en veroorzaakt schade aan de permeabiliteit en integriteit van het celmembraan. Als het een remantilichaam is, verliest het zijn activiteit en remmen. Een waarde van 2 is positief; als het een cytotoxisch antilichaam is, is het positief gekleurd met bepaalde kleurstoffen, waarvoor een beweeglijkheid van het sperma> 70% vereist is. De micromethode heeft slechts een paar microliter monster nodig.Voor monsters met een lage activiteit van sperma, kan het levende sperma worden geëxtraheerd door de stroomopwaartse methode, en het overlevingspercentage kan meer dan 90% bereiken. De praktijk kan alleen antilichamen detecteren die op de spermastaart werken. Sterke specificiteit, slechte gevoeligheid en hoog vals negatief percentage. 3. Passieve hemagglutinatiemethode: de behandelde rode bloedcellen worden gesensibiliseerd met het sperma-extract en het zaadplasma, en de gesensibiliseerde rode bloedcellen reageren met het verdunde serum om te worden getest op de microreactieplaat, en de rode bloedcelagglutinatie is positief. Deze methode wordt niet beïnvloed door de levensvatbaarheid van het sperma, het tellen, microbiële of weefselfragmenten in spermatozoa. De onderzoekers zijn van mening dat deze methode specifiek en gevoelig is, maar er zijn weinig meldingen en de betrouwbaarheid en uitvoerbaarheid moeten nog worden bevestigd. 4. Enzym-gekoppelde immunosorbent assay (ELISA) en biotine-avidine enzym-gekoppelde immunosorbent assay (BA-ELISA): toepassing van intact sperma of spermamembraan antigeen-gecoate vaste fase drager, sperma antilichaam in het te testen en gekweekte monster Het kan dan binden aan het oppervlak van het antigeen. Vervolgens kan het tweede antilichaam van het enzymlabel ook binden aan het oppervlak en vervolgens wordt het enzymsubstraat toegevoegd en wordt het resultaat beoordeeld op basis van de kleurontwikkeling van het substraat. Kan met het blote oog worden waargenomen, kan ook worden gemeten met een microplaatlezer, het laatste objectief en nauwkeurig, over het algemeen meer dan een groep van negatieve optische serumdichtheid plus 2 keer de standaardafwijking positief is. Aangezien het intacte sperma gemakkelijk niet-specifiek wordt geadsorbeerd, is het, als het is bekleed met oplosbaar sperma-membraanantigeen, gevoelig, specifiek, objectief en kwantitatief en kan het het type antilichaam bepalen en is het gemakkelijk te bedienen. BA-ELISA is een nieuwe generatie kwantitatieve assay ontwikkeld op basis van conventionele ELISA, die meer gevoeligheid en specificiteit heeft dan conventionele methoden. 5. Immunobath-test (1 mmunbeadTest, IBT): Polyacrylamide-microsferen bedekt met anti-humaan immunoglobuline-antilichaam kunnen binden aan het sperma-oppervlak gebonden met sperma-antilichaam, en immunobeads kunnen worden gezien met sperma onder fasecontrastmicroscoop of elektronenmicroscoop. Rennen, als het aandeel sperma in combinatie met een of meer immunobeads lo% positief is. Deze methode bepaalt de plaats, het type en het aandeel van gebonden sperma en kan antilichamen detecteren die zijn gebonden aan het oppervlak van levend sperma. Zijn gevoeligheid, specificiteit en reproduceerbaarheid zijn goed, de werking is enigszins omslachtig en de monsters die nodig zijn voor het testen zijn weinig.Het kan worden gebruikt voor de detectie van sporenmonsters zoals baarmoederhalsslijm en eileidervloeistof. 6. Radiolabel immunoglobuline of eiwit A-methode: Isotoop-gelabeld anti-humaan immunoglobuline of druivenzaailing Een eiwit is gebonden aan sperma-antilichamen die aan het oppervlak van het sperma zijn gebonden en de radioactiviteit van het oppervlak wordt gemeten door een x-teller. Als levend sperma als een antigeen wordt gebruikt, zijn de specificiteit en gevoeligheid ervan hoog en kan het type antilichaam worden bepaald. Vanwege de verschillende bronnen van levend sperma in elk experiment zijn de resultaten minder reproduceerbaar, en de apparatuur is duur.De operator is gevoelig voor radioactieve schade, dus deze methode wordt minder gerapporteerd. 7. Indirecte immunofluorescentietest: nadat het oppervlak is gebonden aan het antigeen, kan het binden aan het tweede antilichaam dat is gelabeld met fluoresceïne, en het aandeel positief sperma dat fluorescentie vertoont, wordt waargenomen onder een fluorescentiemicroscoop. Omdat de test methanolfixatie vereist om schade aan het membraan te veroorzaken, wordt het interne antigeen blootgesteld en is het antilichaam tegen het interne antigeen alomtegenwoordig bij de overtollige mensen, dus het vals-positief is te hoog en heeft geen klinische praktische waarde. In de afgelopen jaren is tijdens het experiment de cultuur van de vloeibare fase niet vastgesteld en is de gebruikswaarde van deze methode opnieuw gedefinieerd. 8. Fijne ei-interactie directe inspectie (1) Sperma-transparante bandbinding of penetratietest: het menselijke ei verkregen uit laparoscopie is beter dan de spermatozoa na incubatie onder bepaalde omstandigheden, en of het sperma door de zona pellucida in de ruimte rond de eicel kan passeren, als het sperma niet kan worden gedragen Passeer de zona pellucida en overweeg de aanwezigheid van een remantilichaam. Deze test wordt ook verstoord door andere factoren. (2) sperma-de-transparante hamster-ei-penetratietest (SPA): het geoptimaliseerde geëxtraheerde levende sperma wordt gemengd met de hamstervrije eieren en waargenomen onder een fasecontrastmicroscoop. Als het ei een gezwollen zaadkop (met staart) bevat doordringen. De SPA kan worden gebruikt om te bepalen: 1 het bevruchtingsvermogen van sperma met zaadplasma-antilichamen; 2 het belang van verschillende antilichamen bij het voorkomen van zwangerschap. Deze test kan ook worden beïnvloed door verschillende factoren. (twee) detectie van anti-zaadcelimmuniteit Er zijn weinig studies over celgemedieerde anti-sperma-immuniteit en elke conclusie is anders. Dierproeven en proeven op mensen hebben aangetoond dat antisense cellulaire immuniteit een van de oorzaken van onvruchtbaarheid kan zijn. De assays voor het detecteren van cel-gemedieerde antisense immuunresponsen omvatten lymfocytentransformatie-assay, leukocytadhesieremmingsbepaling, leukocyt- of macrofaagmigratieremmingsbepaling, huidtest en perifeer bloed leukocyten procoagulant activiteitsassay. De gebruikte antigenen zijn verschillend, zoals vers gewassen sperma, bevroren-ontdooid sperma, semi-gezuiverd sperma en dergelijke. Omdat de gebruikte antigenen momenteel niet uniform zijn, zijn de detectiemethoden verschillend, is het aantal onderzoeksgevallen klein, is de specificiteit van elke methode moeilijk te evalueren en zijn de resultaten moeilijk te vergelijken. Ten tweede, de detectie van anti-transparante immuun onvruchtbaarheid De bron van menselijke zona pellucida is beperkt en moeilijk te verkrijgen, maar de menselijke zona pellucida en de varkenszona pellucida hebben kruis-antigeniciteit.Daarom wordt in de praktijk de varkenszona pellucida gebruikt in plaats van de menselijke zona pellucida om het zona pellucida-antilichaam in menselijk serum te detecteren. Omdat de aanwezigheid van heteroloog lectine (voornamelijk IgM) in sommige normale menselijke serum de experimentele resultaten verstoort, zijn verse rode bloedcellen van varkens vereist om het testserum vóór de test te absorberen. 1. Scotchband-precipitatiereactie: Nadat het oppervlak van de zona pellucida aan het antilichaam bindt, verandert de brekingsindex onder een lichtmicroscoop of een donkerveldmicroscoop. Deze methode wordt meestal gebruikt om serum te identificeren, heeft een lage gevoeligheid en is moeilijk te gebruiken in de klinische praktijk. 2. Radioimmunoassay: Na radioactief gelabeld varkenszona pellucida-antigeen en te testen serum wordt het antigeen-antilichaamcomplex geïsoleerd en wordt de radioactiviteit ervan gemeten. Deze methode kan kwantitatief, specifiek en gevoelig zijn, maar vanwege radioactieve schade, en er zijn niet veel rapporten, deze methode is nog steeds moeilijk te bevestigen. 3. Indirecte immunofluorescentieassay: Nadat het menselijke anti-Zona pellucida-antilichaam bindt aan het oppervlak van het varkensei, bindt het anti-menselijke immunoglobuline-antilichaam gelabeld met fluoresceïne aan het oppervlak van de zona pellucida en vertoont het duidelijke peri-fluorescentie onder een fluorescentiemicroscoop. De betrouwbaarheid van deze wet hangt af van andere objectieve methoden. 4. ELISA- en BALISA-methode: de vaste-fasedrager wordt gecoat met het varkenszona pellucida-antigeen en het serum, het tweede antilichaam en het te testen substraat worden toegevoegd en het wassen wordt stap voor stap uitgevoerd en uiteindelijk wordt het resultaat beoordeeld op basis van de kleurverandering van het substraat. Deze methode vereist minder steekproefgrootte, vereist geen speciale apparatuur, is eenvoudig te bedienen, kan kwantitatief antilichamen bepalen en het antilichaamtype bepalen en heeft een goede specificiteit en gevoeligheid. De BA-ELISA heeft de voordelen van een conventionele ELISA en de gevoeligheid ervan is aanzienlijk verbeterd. 5. Passieve hemagglutinatiemethode Het gezuiverde varkenszona pellucida-antigeen wordt gebruikt om de rode bloedcellen van andere soorten als het antigeendoel te coaten, en in aanwezigheid van het zona pellucida-antilichaam agglutineren de gesensibiliseerde rode bloedcellen. Er zijn weinig rapporten over deze methode en het is moeilijk om de gevoeligheid en specificiteit ervan te evalueren. 6. Sperma-transparante bandbinding of penetratietest: deze methode kan positief zijn als er een Zona pellucida-antilichaam of een anti-sperma-antilichaam is. Omdat de test sterk wordt beïnvloed door de factoren van de cultuuromgeving, zijn de onderzoeksresultaten van verschillende laboratoria moeilijk te vergelijken. Deze methode kan worden toegepast in combinatie met andere methoden om elkaar aan te vullen om de betrouwbaarheid van de resultaten te waarborgen. Niet geschikt voor het publiek Het onderzoek is minder invasief en heeft over het algemeen geen contra-indicaties. Bijwerkingen en risico's Deze test is minder invasief en veroorzaakt over het algemeen geen ernstige complicaties of andere gevaren.