Enzymgekoppelde immunosorbenstest

De enzym-gekoppelde immunosorbentest is een enzym-gekoppelde immunosorbentest. Het wordt gebruikt om het te testen antigeen (of antilichaam) te detecteren dat in de put van de vaste faseplaat is gecoat. Dat wil zeggen, het antilichaam wordt gemerkt met een enzym en het bekende antigeen of antilichaam wordt geadsorbeerd op het oppervlak van de vaste-fase-drager, en de antigeen-antilichaamreactie wordt uitgevoerd op het oppervlak van de vaste-fase-drager, en de vrije component in de vloeibare fase wordt weggewassen door wassen, en tenslotte inwerkt op door het enzym. De kleur wordt ontwikkeld na het substraat om het resultaat te beoordelen. De diepte van de kleurreactie is evenredig met de hoeveelheid van het overeenkomstige antilichaam of antigeen in het monster. Deze kleurreactie kan kwantitatief worden bepaald door een ELISA-detector, die de gevoeligheid van de chemische enzymreactie combineert met de specificiteit van de antigeen-antilichaamreactie, waardoor de ELISA-methode een zowel specifieke als gevoelige detectiemethode wordt. Basis informatie Specialistenclassificatie: classificatie van groei- en ontwikkelingscheck: immunologisch onderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: niet vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: Normaal. positief: Het menselijk lichaam bevindt zich in een dynamisch evenwicht en ongezonde staat. Tips: ontspan tijdens het controleren. Normale waarde Het type en de proportie van de flora in het lichaam zijn normaal en het menselijk lichaam bevindt zich in een staat van dynamisch evenwicht en gezondheid. Klinische betekenis De enzymgebonden immunosorbentassay is de meest gebruikte techniek in enzymimmunoassay. Veelgebruikte ELISA-methoden omvatten een dubbele antilichaam-sandwichmethode en een indirecte methode, de eerste voor het detecteren van macromoleculaire antigenen en de laatste voor het meten van specifieke antilichamen. In termen van parasitaire ziekten, wordt het gebruikt voor serologische diagnose van Plasmodium, Amoeba, Liegemann, Trypanosoma, Schistosomiasis, cysticercosis, Toxoplasma, Schistosomiasis, Leverbot, Bloedworm, Trichinosis Dit is belangrijk voor zowel artsen als dierenartsen. Het is gebruikt om antilichamen tegen Streptococcus, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida, enz. Te detecteren en kan ook worden gebruikt voor tetanus antitoxine en Vibrio cholerae antitoxine. De bepaling en detectie van antilichamen tegen rickettsia rickettsia-infectie kan worden gediagnosticeerd. Rickettsia kan ook worden gebruikt om nauw verwante soorten te identificeren. Er zijn ook rapporten voor het onderzoeken van antilichamen tegen Chlamydia psittaci. Griepvirus, bofvirus, mazelen, rodehond, rotavirus, herpesvirus, cytomegalovirus, EB-virus, adenovirus, enterovirus, encefalitisvirus, gele koortsvirus, hondsdolheid Giftig en poliovirus, enz., Zijn gevoeliger dan de momenteel gebruikte inspectiemethoden. Bij immunologische ziekten zijn er tests voor de detectie van auto-immuunziekten en de diagnose van allergieën, zoals antilichamen tegen verschillende allergenen, DNA-antilichamen en thyroglobuline-antilichamen, erythematosus-antilichamen en dergelijke. In hygiëne kan het worden gebruikt om staphylococcus-enterotoxine en salmonella-toxine in voedingsmiddelen te detecteren. Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: verworven bulleuze epidermolyse, trypanosomiasis, schistosomiasis en hepatobiliaire ziekten, toxoplasmosis scleritis, Gestman-syndroom, aangeboren toxoplasmose bij pasgeborenen, leverbot, Siberische rickettsia gevlekte koorts, intestinale piriflagellaat, toeristische diarree voorzorgsmaatregelen 1. Substraat: Verschillende enzymen hebben specificiteit voor het substraat, dus het gebruik van verschillende soorten enzymen vereist verschillende substraten. Nadat het enzymconjugaat is bepaald (bijvoorbeeld AP of HRP), is het bereik van de voor selectie beschikbare substraten zeer beperkt. Hoe een geschikt substraat binnen het bereik van dit beperkte substraat te selecteren, moet worden geselecteerd op basis van de volgende voorwaarden: (1) Het substraat moet kleurloos zijn voordat het door het enzym wordt gekatalyseerd en moet een duidelijke kleur hebben nadat het door het enzym is gekatalyseerd. Verandering, zodat de resultaten duidelijk kunnen worden onderscheiden; (2) de kleur is gemakkelijk te drogen en te elueren; (3) het product moet na kleurontwikkeling stabiel zijn, de in de kwantitatieve bepaling geproduceerde gekleurde stof moet oplosbaar zijn; (4) de prijs Goedkoop, gemakkelijk te krijgen en niet giftig. Daarom wordt voor het AP-enzymconjugaat in het algemeen nitrofenylfosfaat gebruikt en is de kleur oranje na kleurontwikkeling en is de kleur stabiel.De reactie wordt beëindigd met 2 mol / L NaOH en de OD-waarde kan worden gemeten bij een golflengte van 403 nm. 2. Wasmiddel en verdunner: Om de specifiek gebonden hoeveelheid antilichaam te maximaliseren, moet het in de put van de microplaat gecoate antigeen enigszins overmatig zijn. Tijdens incubatie of wassen kan echter een deel van het geadsorbeerde antigeen van de vaste drager worden weggewassen. Daarom is het waarschijnlijk dat het andere eiwit dan het specifieke antilichaam dat aan het testserum is toegevoegd, adsorbeert aan de blanco van de oorspronkelijke met antigeen gecoate put, waardoor de achtergrondkleur wordt verhoogd en een vals-positieve reactie wordt gegenereerd, hetgeen een factor is die de specificiteit van de ELISA beperkt. Veel geleerden hebben verschillende beschermende middelen toegevoegd aan verdunningsmiddelen en wasmiddelen om de competitieve adsorptie van niet-specifieke eiwitten te remmen. Inspectie proces De basismethode is om een bekend antigeen of antilichaam op het oppervlak van een vaste-fase-drager (polystyreen microreactieplaat) te adsorberen, de met enzym gemerkte antigeen-antilichaamreactie op het oppervlak van de vaste fase te laten reageren en de vrije componenten in de vloeibare fase te wassen door te wassen. in toevoeging. Volgens de vaste-fase-drager die in ELISA wordt gebruikt, is deze in drie typen verdeeld: de ene is ELISA met polystyreen-microplaat als drager, dat is de ELISA (microplaat ELISA) waarnaar we meestal verwijzen; de andere gebruikt nitrocellulosemembraan als drager. De ELISA wordt vlek-ELISA (Dot-ELISA) genoemd; de andere is ELISA met hydrofoob polyesterdoek als drager, genaamd doek ELISA (C-ELISA). In de microplaat ELISA is het verder onderverdeeld in indirecte ELISA, dubbele antilichaam sandwich ELISA, dubbele sandwich ELISA, competitie ELISA, blokkerende ELISA en antilichaam vangende ELISA volgens zijn eigenschappen. Niet geschikt voor het publiek Er zijn geen speciale taboes. Bijwerkingen en risico's Er zijn geen gerelateerde complicaties en gevaren.