Test op vorming van erytrocytenslingers bij ratten

B-lymfocyten zijn betrokken bij de synthese van antilichamen en zijn effectorcellen van humorale immuunresponsen. Het oppervlak van B-cellen draagt membraanoppervlak-immunoglobuline (SmIg), Fc-receptoren en complementreceptoren. Het bindt sterk aan het Fc-gedeelte van het antigeen-antilichaamcomplex. Rode of rode bloedcellen van kippen of schapen worden geselecteerd en gesensibiliseerd in EA-complexen met overeenkomstige anti-erytrocytenantilichamen.De Fc-receptor van B-cellen kan een slinger vormen met EA, die EA-krans wordt genoemd. Als het EA-complex wordt toegevoegd om te complementeren en bindt aan de complementreceptor van B-cellen, wordt een EAC-rozet gevormd. Er zijn muizen-RBC-receptoren op het oppervlak van B-cellen, die kunnen binden aan muis-RBC's om erytrocytenrozetten van muizen (M-RFC) te vormen, die voornamelijk binden aan B-cellen met IgM-receptoren, en M-RFC's zijn meestal naïeve B-cellen. Deze test wordt hoofdzakelijk gebruikt om het aantal B-lymfocyten te detecteren en om het niveau van humorale immuniteit te bepalen. Basis informatie Specialistenclassificatie: examenclassificatie: bloedonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Het percentage ME-rozetten was echter verminderd of afwezig zonder agammaglobulinemie en ernstige gecombineerde immunodeficiëntie. Normale waarde: Percentage ME in vrouwelijk perifeer bloed: 5% -10% Boven normaal: Het percentage ME-kransen in perifeer bloed van patiënten met chronische lymfatische leukemie is maar liefst 60% tot 80%. negatief: positief: Tips: ontspan alsjeblieft bij het controleren. Normale waarde Resultaten 200 lymfocyten werden geteld onder de microscoop De lymfocyten die 3 of meer rode bloedcellen van muizen adsorbeerden waren B-lymfocyten, en het percentage muiscelslingers (ME-kransen) werd berekend. Het percentage ME-rozet in normaal menselijk perifeer bloed is 5% tot 10%. Klinische betekenis Het percentage ME-kransen in perifeer bloed van patiënten met chronische lymfatische leukemie is 60% tot 80%, maar er is geen gamma-globulinemie, ernstige gecombineerde immunodeficiëntie, enz., En het percentage ME-slingers is verminderd of afwezig. Lage resultaten kunnen ziekten zijn: X-gebonden no-gammaglobulinemie bij kinderen, hoge incidentie van secundaire immunodeficiëntie bij kinderen kan ziekte zijn: voorzorgsmaatregelen voor chronische lymfatische leukemie (1) Incubatietijd: het percentage ME steeg geleidelijk met de incubatietijd. Na incubatie gedurende 1 uur was het ME-percentage 7,4 ± 3,1% en de incubatie werd verhoogd tot 18,3 ± 3,8% na 18 uur. Na 72 uur incubatie werd het aantal kransen verhoogd. Het daalde geleidelijk tot 3,4 ± 7,1%. (2) Cultuuroplossing: het is het meest geschikt om de Tc199-cultuuroplossing te gebruiken en de resultaten en herhaalbaarheid zijn goed. Wassen en opnieuw suspenderen van lymfocyten en rode bloedcellen met Hepes-gebufferd RPMl1640-medium resulteerde in cellen die de neiging hebben te aggregeren en grote cellen te vormen, wat resulteert in onbetrouwbare resultaten. (3) Wanneer de optimale verhouding van rode bloedcellen tot lymfocyten ongeveer 35: 1 is, is de verhouding> 60: 1 of is de verhouding <25: 1, kan het aantal ME-kransen worden verminderd. (4) Behoud van MRBC-kweekoplossing: in Alsever-oplossing produceert MRBC gedurende 1 week bewaard bij 4 ° C nog steeds een stabiel aantal slingers, terwijl MRBC wordt opgeslagen in PBS, zoutoplossing of Tc199-kweekmedium, met een langere opslagtijd, het aantal kransen Geleidelijk, na 72 uur opslag, kunnen alleen kleine of slingervormende cellen worden gezien. Inspectie proces (1) Neem 1 ml van de bovenstaande suspensie van rode bloedcellen van muis, voeg 3 ml fysiologische zoutoplossing toe, meng goed, 1500 r / min, centrifugeer gedurende 10 minuten, was in totaal 3 keer en bereid tenslotte 1% rode bloedcelsuspensie van muis met fysiologische zoutoplossing (ongeveer 1,4 x 108) cellen / ml). (2) 1,5 ml heparine werd genomen voor antistolling, lymfocyten werden gescheiden door gelaagdheid van lymfocyten en de celconcentratie werd ingesteld op 2 x 107 / ml met 20% kalfserum Hank-oplossing. (3) Neem 0,1 ml lymfocytsuspensie, voeg een gelijke hoeveelheid 1% muis rode bloedcelsuspensie toe, meng en plaats gedurende 10 minuten in een waterbad van 37 ° C, 500 r / min, centrifugeer gedurende 10 minuten, zet 2 ° 3 uur in de koelkast op 4 ° C. (4) Pipetteer 0,05 ml supernatant, voeg 1 druppel 2g / L blauwe oplossing toe, draai voorzichtig om te mengen, neem 1 druppel van het mengsel op de dia, dek het dekglaasje af, nadat de cellen zinken, Controleer met een krachtige microscoop. Niet geschikt voor het publiek Er is geen ongepast publiek. Bijwerkingen en risico's Het is een veilige controle en is onschadelijk voor het lichaam.