Neutralisatietest

De neutralisatietest is gebaseerd op de bepaling van de infectiviteit van het virus en het vermogen van het immuunserum om het virus te neutraliseren op basis van de vergelijking van de resterende infectiviteit van het virus na neutralisatie door het immuunserum. Wanneer een dier met een virus is geïnfecteerd, wordt een specifiek neutraliserend antilichaam in het lichaam geproduceerd en bindt het specifiek aan het overeenkomstige virion, waardoor wordt voorkomen dat het virus aan de gevoelige cel adsorbeert of zijn invasie remt, zodat het virus zijn vermogen om te infecteren verliest. Basis informatie Specialistenclassificatie: Onderzoek naar infectieziekten en classificatie: immunologisch onderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: niet vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: Minder dan 10 is negatief en geen virus. 10 tot 49 zijn verdacht. positief: Over het algemeen wordt een neutralisatie-index groter dan 50 als positief beschouwd en is er een virus aanwezig. Tips: let op normale eetgewoonten en let op persoonlijke hygiëne. Normale waarde Vaste serumverdunningsvirusmethode: voor virussen is de neutralisatie-index meestal groter dan 50 en zijn 10 tot 49 verdacht en is minder dan 10 negatief. Normalisatietest normale waarde: het menselijk lichaam bevindt zich in een dynamisch evenwicht en is gezond. Klinische betekenis Deze test wordt voornamelijk gebruikt om antilichamen uit het te testen serum te detecteren, of om virussen van het ziektemateriaal te detecteren, waardoor virale infecties worden gediagnosticeerd; 2 om de toxines in de materialen te controleren met anti-toxineserum of om het type toxines in de bacteriën te identificeren; Viraal serum of anti-toxinetiter; 4 Identificatie en typering van nieuw geïsoleerde virussen, neutralisatietest kan niet alleen worden uitgevoerd bij gevoelige proefdieren, maar ook op celcultuur of kippenembryo's. De testmethoden omvatten voornamelijk eenvoudige kwalitatieve test, vaste serumverdunningsvirusmethode, vaste virusverdunningsserummethode en plaque-reductiemethode. Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: bof, aids, knokkelkoorts, Japanse encefalitis, uitslag van het Coxsackie-virus, mond- en klauwzeer, voorzorgsmaatregelen tegen hondsdolheid Verboden voor onderzoek: let op normale eetgewoonten en let op persoonlijke hygiëne. Vereisten voor inspectie: actief samenwerken met de arts. Inspectie proces (1) Eenvoudige kwalitatieve neutralisatietest Deze methode wordt voornamelijk gebruikt om het virus in het ziektemateriaal te detecteren en kan ook in eerste instantie worden geïdentificeerd of voltooid. Proefdieren (of kippenembryo's, celkweek) en inentingsroutes worden eerst geselecteerd op basis van virale gevoeligheid. Het materiaal wordt gemalen en verdund tot een bepaalde concentratie (ongeveer 100 LD50 ~ 1000 LD50 of TCID50). Verontreinigde materialen moeten worden toegevoegd antibiotica (200 tot 1000 eenheden penicilline en streptomycine), of gefilterd met een bacteriefilter, gemengd met bekend antiserum (goed verdund of niet verdund) en verdund met normaal serum Ter vergelijking. Na mengen werden de cellen 1 uur bij 37 ° C en ten minste 3 dieren in elke groep geïnoculeerd. Isolatie voeding, observatie van morbiditeit en mortaliteit. De controledieren stierven, terwijl de dieren in de neutralisatiegroep niet stierven, hetgeen bevestigde dat de ziekte het virus bevatte dat overeenkomt met het antiserum. Deze methode kan ook worden gebruikt voor het identificeren en typen van toxines (zoals toxines). (2) Vaste serumverdunningsvirusmethode Bij deze methode werd het virus 10-voudig in stappen verdund en werden twee buizen geplaatst, de eerste kolom werd toegevoegd met normaal serum (controlegroep) en de tweede kolom werd toegevoegd met te testen serum (testgroep). Na het mengen werden de cellen gedurende 1 uur bij 37 ° C geïnoculeerd en elk buismengsel werd afzonderlijk in de geselecteerde testdieren geïnoculeerd en voor elke verdunning werden 3 tot 5 dieren gebruikt. Na inenting dagelijks observeren en het aantal sterfgevallen noteren. Bereken na de observatie de LD50 en neutralisatie-index (tabel 7-1, tabel 7-2). Deze methode is van toepassing op de detectie van een groot aantal monsters. Deze methode wordt meestal gebruikt om neutraliserende antilichamen in het te testen serum te detecteren.Voor virussen is de neutralisatie-index meestal groter dan 50 en is positief, 10 tot 49 is verdacht en minder dan 10 is negatief. (3) Serummethode met vaste virusverdunning Deze methode wordt gebruikt om de neutralisatieprijs van antiviraal serum te bepalen.Het te testen serum wordt 2 keer verdund en de virusoplossing met dezelfde toxische waarde wordt toegevoegd (gemengd met serum, elke dosis bevat 100LD50 virus), goed schudden. De testdieren werden 1 uur bij 37 ° C geïnoculeerd. Let op: [1] Inoculatiedosis 0,1 ml, bevattende virus 100LD50. [2] verwijst naar de verdunning na menging met het virus. [3] De noemer is het aantal inentingen en de teller is het aantal bescherming. [4] PD50 biedt halve bescherming en de berekeningsmethode is dezelfde als de LD50-berekening. (4) methode voor het verminderen van plaque De virusneutralisatietest werd uitgevoerd op celkweek en in de afgelopen jaren werd de plaque-reductiemethode vaak gebruikt. Eerst wordt het virus verdund tot een geschikte concentratie, zodat 80 tot 100 PFU (plaquevormende eenheid) per 0,2 ml wordt gemengd met de verschillende verdunningen van het te testen serum en gedurende 1 uur tot 2 uur bij 37 ° C worden geplaatst om PFU te meten. Een serumverdunning van 50% van de plaque is de neutralisatieprijs van het serum. Zie tabel 7-4. Tabel 7-4 Voorbeeld van neutralisatietest voor plaque-reductiemethode Let op: [1] Serum werd verdund in 4-voudige stappen. [2] De plaque wordt verminderd met 50% van de serumverdunning en de berekeningsmethode is dezelfde als de berekening van LD50. Niet geschikt voor het publiek Mensen met een verminderde hematopoietische functie zoals leukemie, verschillende bloedarmoede, myelodysplastisch syndroom of mensen met trombocytopenie moeten op bloedafname letten en mogen niet meer of meer bloed nemen. Bijwerkingen en risico's 1. Nadat het bloed is afgenomen, drukt u niet op het naaldgat om subcutaan hematoom te voorkomen. Als er een klein stukje blauwe plek in het bloed zit, is het een beetje zacht, geen paniek, u kunt na 24 uur een heet kompres doen om de absorptie van bloed te bevorderen. De algemene kleine hoeveelheid congestie absorbeert geleidelijk na 3 tot 5 dagen en de kleur wordt lichter en keert terug naar normaal. 2. Na de bloedafname moeten symptomen zoals duizeligheid, duizeligheid, vermoeidheid, enz. Onmiddellijk in ruglig liggen, een kleine hoeveelheid siroop drinken en vervolgens een lichamelijk onderzoek ondergaan nadat de symptomen zijn verlicht.

heeft dit artikel jou geholpen?

Het materiaal op deze site is bedoeld voor algemeen informatief gebruik en is niet bedoeld als medisch advies, waarschijnlijke diagnose of aanbevolen behandelingen.